단백질 전기영동
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작성일 24-04-01 02:40
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⑥ 식힌다.
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설명
순서
1.Title: 단백질 전기영동(1)
2.Date: 2004.11.02
3.Object: 전기영동을 통하여 식물내의 단백질을 알아보자
4.Material & Method : 식물의 잎, 줄기 혹은 뿌리, 에펜튜브, 원심분리기, heat plate, lysis buffer, SDS-PAGE sample buffer, 파이펫, 막자사발, 얼음튜브
① 단백질을 정량할 식물의 부분을 막자사발을 이용하여 lysis buffer(1ml)와함께 갈아준다.
② 원심분리를 한다.(max5분 정도)
③ 2번의 상층액(100㎛) 을 2X SDS-PAGE sample buffer와 섞는다.(max에서 5분정도)
⑤ 90℃이상에서 5분정도 가열한다.
④ 원심분리를 한다. -보관
5.Further study
-용액의 조성1 X lysis buffer
1% NP-40
120 mM NaCl
40 mM Tris-HCl (pH8.0) + 1 mM PMSF (or 100 ug/ml)
>> 250 ul 4℃ 30’ >> 12,000 rpm, 30’
10 mM Phenylmethyl sulfonyl fluoride (PMSF); Dissolve PMSF in isopropanol at a concentration of 1.74 mg/ml (10mM). Divide the solution into aliquots and store at -20℃.
2…(투비컨티뉴드 )
6.pre-report
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